赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。     

赤灵芝段木栽培新技术研究

短段木仿野生栽培灵芝是近年发展起来的灵芝人工栽培新法,应用于大规模生产。本文将栽培要点归纳为:熟材短段木断面接种室内培菌(野外)大棚覆土栽培。     

灵芪菌质发酵工艺初报

目的:探讨灵芪菌质发酵的工艺,验证药用真菌新型固体发酵的优越性.方法:将灵芝分别在普通基质、药性基质(含黄芪)、富硒药性基质中发酵,对三种基质中菌质的有效部位多糖的含量进行测定及动态研究,比较其变化.结果:三种基质中菌质有效部位多糖含量及其相对标准差分别为4.65%、1.61%,3.76%、1.99%,4.50%、1.86%;对灵芝和黄芪发酵组合的有效成分多糖、蛋白质及总皂苷进行动态变化研究,发现第28天是发生次生代谢最旺盛的时候,确定为发酵终点.结论:灵芝和黄芪发酵组合是可行的.     

女贞子中红景天甙元的分析与测定

对女贞子的成分进行薄层层析和紫外薄层扫描含量测定，结果表明．女贞子含有齐墩果酸和红景天甙元──酪醇，后者含量高达０．８３％，接近于四裂红景天中的含量，可为红景天的资源寻找和女贞子的开发利用提供参考。     

催化光度法测定灵芝中微量锌

目的　研究催化光度法测定灵芝中微量锌。　方法　在非离子表面活性剂 Tween- 80存在下 ,于 p H9.5 0 NH3- NH4 Cl缓冲溶液中 ,Hg( )催化加速 Zn( )与 meso- 4 (4 -甲基 ,3-磺基苯基 )卟啉 (TTPS4 )的显色反应。　结果　 Zn( )与 TTPS4 、Tween- 80形成很稳定的三元配合物 ,其ε=3.86× 10 5,Zn( )浓度在 0 .0 0 5～ 0 .10μg/ m L,符合比尔定律 ,检出限为 0 .0 0 1μg/ m L。　结论　 Tween- 80对 Zn( )与 TTPS4 显色有增敏 ,而 Hg( )催化加速 Zn( )与 TTPS4 显色反应 ,应用本法可直接测定灵芝中的微量锌     

Zur histogenese und cytogenese des tapetum lucidum cellulosum der katze

Zusammenfassung Die postnatale Entwicklung des Tapetum lucidum cellulosum der Katze wird mit licht- und elektronenmikroskopischen Methoden untersucht. Bereits am ersten postnatalen Tag sind im Bereich des prospektiven Tapetum zwei Zellarten voneinander zu unterscheiden: 1. mesenchymale Bindegewebszellen und 2. prospektive Tapetumzellen, die durch elektronendichte Tapetumstäbchen gekennzeichnet sind. Die Mesenchymzellen unterteilen als parallel zur Retinaoberfläche ausgebreitete Zellplatten in der Choriodea am hinteren Augenpol den weiten extracellulären Raum in 20–25 etwa 5 m hohe Schichten. Die Tapetumzellen liegen zwischen den Mesenchymzellplatten und wachsen im Verlaufe der ersten vier postnatalen Wochen innerhalb der Schichten in die Breite, bis sie den extracellulären Raum vollständig ausfüllen und als polygonale Zellen direkt aneinander grenzen. Im weiteren Verlauf der Entwicklung werden die Mesenchymzellplatten rückgebildet, so daß bei der adulten Katze die Tapetumzellschichten direkt übereinander liegen und nur von Netzen elastischer und kollagener Fasern getrennt sind.Die von einer Elementarmembran umgebenen Tapetumstäbchen enthalten einen elektronendichten, in den ersten postnatalen Wochen mit einer Periode von 100 Å quergestreiften Kern. Zunächst nehmen sie an Zahl und Länge zu und füllen am Ende der vierten postnatalen Woche, zu Bündeln von parallel verlaufenden Stäbchen geordnet, das Cytoplasma der Tapetumzellen. Dann nehmen die Tapetumstäbchen an Dicke zu, und ihre Querstreifung wird von einem elektronendichten Material überlagert. Die Entwicklung der Tapetumstäbchen hat eine starke Ähnlichkeit mit der in der Literatur beschriebenen Entwicklung von Melanosomen in Melanocyten. Das Tapetum lucidum cellulosum wird als ein dichter Verband hochdifferenzierter extrakutaner Melanocyten angesehen.

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Summary The postnatal development of the tapetum lucidum cellulosum of the cat was studied by light and electron microscopy. Already by the first postnatal day two cell types can be distinguished in the prospective tapeta area: 1. mesenchymal cells and 2. prospective tapetal cells, characterized by electron dense, membrane bound, rod-like inclusions. The flattened mesenchymal elements form 20–25 separate layers of cells, which are arranged parallel to the surface of the retina, subdividing the extracellular space of the chorioidea at the posterior pole of the eye into 5 m high compartments. These compartments contain the tapetal cells which enlarge (in their longitudinal axis) during the first four weeks post partum until they occupy the extracellular space almost completely. At this stage, the tapetal cells are polygonal in shape and closely attached to each other. During the subsequent period of development there is a gradual involution of the mesenchymal cell plates. Thus, in adult cats the individual layers of tapetal cells are only separated from each other by networks of collagen and elastic fibers.The tapetal rods are bound by unit membranes and contain an electron dense core which, during the early postnatal weeks, exhibits a periodic cross-striation (100 Å). The tapetal rods increase in number and length during the first four weeks post partum; by the end of the fourth week, they occupy the whole cytoplasm of the tapetal cells. Parallelly arranged rods are grouped into individual bundles coursing inside the cytoplasm in different directions. Thereafter, the tapetal rods increase in thickness and their cross-striation becomes obscured by an electron dense material. This development of the tapetal rods closely resembles that of melanosomes.Thus the tapetum lucidum cellulosum can be regarded as a compact tissue made up of modified extracutaneous melanocytes.

Auszugsweise vorgetragen auf der 69. Versammlung der Anatomischen Gesellschaft in Kiel, Juni 1974.     

RP—HPLC法测定不同部位灵芝中灵芝酸B含量

目的：测定灵芝中具有苦味的成分灵芝酸B在灵芝中不同部们的含量,方法：采用RP－HPLC法测定灵芝菌盖的表皮层,木栓层,菌柄,孢子粉,菌盖子实体等部位分中灵芝酸B的含量,结果：灵芝药材中灵芝酸B主要集中在灵芝的表皮部位,其它部位则较少,结论：为寻找灵过的有效成分分布规律提供了客观依据。     

灵芝菌发酵培养基的优化及灵芝胞外多糖的分离纯化

用正交法研究了不同条件对灵芝菌生长影响,从中选出了灵芝 菌液体深层发酵的优化 培养基：葡萄糖 3.6%,蛋白胨 0.4%,pH 6.0,酵母膏 0.2%,KH2PO40.1%,MgSO 4· 7H2O 0.05%,Vit B1 0.005%,每升发酵液产干菌丝体 15.6 g,粗多糖 0.72 g。 经葡 聚糖凝胶层析对灵芝胞外多糖进行了分离纯化,共有 5 个组分,并用红外光谱、紫外光谱 ,气相色谱等手段进一步分析了灵芝胞外多糖的组成,结果表明灵芝胞外多糖系由甘露糖、 果糖、葡萄糖通过糖 β-D 糖苷键构成。     

灵芝促学习记忆及抗衰老作用实验研究

目的 :研究灵芝对血虚小鼠自发行为、学习记忆及抗衰老作用。方法 :血虚小鼠用灵芝水煎剂 ,对照组小鼠用生理盐水灌胃 ,连续 13d,期间进行小鼠开场行为和学习记忆的测定 ,以及小鼠应急力竭游泳后 2 4 h分别对小鼠脑、肝的超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,脑、肝、心、脾、肌的丙二醛 (MDA)、脂褐素 (L PF)含量进行测定。结果 :灵芝对血虚小鼠开场行为中的理毛次数有显著影响 (P<0 .0 5 ) ,但对移动隔数、站立次数以及学习记忆未产生显著影响。灵芝能显著提高血虚小鼠脑、肝中的 SOD活性 (P<0 .0 5 ) ,显著降低脑、肝、心、脾、肌的 MDA、L PF的含量 (P<0 .0 5 )。结论 :灵芝可促进血虚小鼠的自发活动 ,且抗衰老作用显著